货号：P6556

品牌：Sigma-Aldrich

品名：蛋白酶 K 来源于林伯氏白色念球菌

产品说明：lyophilized powder, ≥30 units/mg protein

别名：肽链内切酶

CAS号：39450-01-6

EC 号：3.4.21.64 (BRENDA, IUBMB)

EC 号：254-457-8

MDL编号：MFCD00132129

eCl@ss：32160410

NACRES：NA.54

【属性】

形式

lyophilized powder

质量水平

300

specific activity

≥30 units/mg protein

分子量

28.93 kDa

溶解性

H2O： soluble 1 mg/mL, clear, colorless

异质活性

Dnase ≤30 Kunitz units/mg solid

RNase ≤0.003 Kunitz units/mg solid

运输

wet ice

储存温度

−20°C

【说明】

应用

P6556产品为冻干粉形式。P6556产品已可用于分解人晶状体蛋白[。蛋白酶K消化的蛋白酶印迹可以揭示蛋白质与蛋白质表面

的相互作用。Sigma的该酶已用于鸡胚的预杂交。它还被用来富集PrPSc，一种存在于羊、仓鼠和老鼠痒病样本中的朊病毒蛋白。

在分离DNA和RNA的过程中，用于核酸酶的蛋白水解失活。

用于去除内毒素结合的阳离子蛋白，如溶菌酶和核糖核酸酶A。

据报道，其可用于分离肝、酵母和绿豆线粒体

用于测定酶在细胞膜上的定位

用于石蜡包埋组织切片的处理，暴露用于抗体标记的抗原结合位点。

用于可传播海绵状脑病(TSE)研究中朊病毒脑组织样本蛋白的消化。

在分离DNA和RNA的过程中，蛋白酶K对核酸酶的蛋白水解失活起作用。

它被用于去除内毒素结合的阳离子蛋白，如溶菌酶和核糖核酸酶A。

它可用于分离肝、酵母和绿豆线粒体

，并用于测定酶在细胞膜上的定位

用于石蜡包埋组织切片的处理，暴露用于抗体标记的抗原结合位点，并

用于可传播海绵状脑病(TSE)研究中朊病毒脑组织样本蛋白的消化。 P6556产品为冻干粉形式。 P6556产品已可用于分解人晶

状体蛋白。

生化/生理作用

蛋白酶K具有广泛的特异性，即使在天然状态下也能降解许多蛋白质。它主要裂解脂肪族和芳香族氨基酸羧基附近的含有封闭

α-氨基的肽键。最佳pH值在7.5-9.0之间，等电点为8.9，其活性激活需要 Ca2+ (1-5 mM)。蛋白酶K可被二异丙基氟磷酸(DFIP)

和苯甲磺酰氟(PMSF)抑制。

蛋白酶K是一种稳定且具有高活性的丝氨酸蛋白酶。晶体和分子结构研究证据表明该酶属于枯草素家族，具有活性位点催化三联

体(Asp39-His69-Ser224)。它在一系列广泛的环境中均稳定：pH，缓冲盐，去污剂（SDS）以及温度。 在0.1-0.5% SDS存在

的情况下，蛋白酶K可保持活性，在不损害分离DNA完整性的前提下，可以消化DNA制剂中的多种蛋白质和核酸酶。

单位定义

一单位在37°C、pH 7.5条件下每分钟可水解尿素变性血红蛋白而产生相当于1.0μmole(181 μg)的酪氨酸显色（福林酚试剂显色