货号：DN25

品牌：Sigma-Aldrich

品名：脱氧核糖核酸酶 I 来源于牛胰腺

产品说明：lyophilized powder, Protein ≥85 %, ≥400 Kunitz units/mg protein

别名：脱氧核糖核酸酶, DNase I, 脱氧核糖核酸 5′-寡核苷酸-水解酶

CAS号：9003-98-9

EC 号：3.1.21.1 (BRENDA, IUBMB)

EC 号：232-667-0

MDL编号：MFCD00130918

【属性】

形式

lyophilized powder

质量水平

300

specific activity

≥400 Kunitz units/mg protein

分子量

~31 kDa

组成

Protein, ≥85%

溶解性

0.15 M NaCl: soluble 5.0 mg/mL, hazy

application(s)

diagnostic assay manufacturing

diagnostic assay manufacturing

异质活性

RNase ≤0.02%

运输

wet ice

储存温度

−20°C

【说明】

一般描述

DNase I（脱氧核糖核酸酶I）是一种从牛胰腺分离的核酸内切酶。

我们的DNase I可将双链和单链DNA酶解成寡核苷酸和单核苷酸。

牛胰腺DNase存在四种异构酶A, B, C和D，均具有不同的等电点：5.22, 4.96, 5.06及4.78.3。主要形式为A，其次为B和C，D所

占的比例最小。

DNase I结构类似于核酸外切酶III。其中包括两个中央β折叠。每个β折叠由六个β-链组成。这种复杂的β折叠被大量环形和螺旋

形区域包围。该酶结构类似于核酸外切酶III。

应用

从原代细胞分离液中去除DNA，在降低粘度的同时提高产量：

将标记碱基掺入DNA：DNA缺口

放射性标记

生物工艺应用：DNA去除

在RT-PCR前从RNA制剂中去除基因组DNA

体外转录

缺口平移

DNase足迹

肌动蛋白调控胞内肌动蛋白聚合和细胞凋亡

蛋白质与核酸紫外线交联

DNase参与调控胞内肌动蛋白聚合，同时参与细胞凋亡过程 

用于从蛋白质样品中除去 DNA。

生化/生理作用

DNase I是一种内切核酸酶，可作用于与嘧啶相邻的磷酸二酯键以产生具有末端5′-磷酸的聚核苷酸。当Mg2+存在时，

DNAse I可独立切割DNA的每条链且切割位点是随机的。当Mn2+存在时，两条DNA链都几乎是在同样的位置被切割。

二价阳离子如Mn2+, Ca2+, Co2+以及Zn2+都是酶的激活剂。5 mM浓度的Ca2+可稳定酶免收蛋白水解酶的消化。

最适pH在7-8之间。来自牛胰腺的DNAse I由四种色谱可区分的组分A，B，C和D组成，它们的摩尔比分别为4:1:1。

仅发现少量D。2-巯基乙醇、螯合剂、十二烷基硫酸钠（SDS）和肌动蛋白都已知可抑制酶的活性。

特点和优势

我们的脱氧核糖核酸酶DNAse I基本属于不含RNAse产品，支持该产品应用。

单位定义

一Kunitz单位的酶在以I型或III型DNA作为底物时，在 pH 5.0，37°C的条件下在每mL中每分钟可引起0.001的A260改变。

外形

粗制品，含有氯化钙

制备说明

溶液0.15 M NaCl的10 mg/mL DNAse I溶液分装保存在−20 °C一周后可能会丢失<10%的活性。同样的溶液保存在2-8 °C则

可能丢失约20%的活性。当在pH 5和7之间时，它可在60 °C维持活性最长达五小时，并在68 °C <10分钟内丢失活性。它在乙

酸缓冲液（pH 5.0）和tris缓冲液((pH 7.2)，1 mg/mL浓度)中以6%/小时的速率丢失活性。

分析说明

通过缩二脲法测定的蛋白质。